1. عند تحديد الذيفان الداخلي في الدم ، انتبه إلى اختيار الطرق والكواشف.
2. تحضير البلازما أو المصل
كعينة سريرية شائعة ، البلازما هي العينة الرئيسية ، ومعدل استخدامها أكثر من 95٪. لذلك ، من المهم جدًا تحضير البلازما كجزء أساسي من سوائل الجسم. وفقًا لـ Das ، يرتبط الذيفان الداخلي عمومًا بالصفائح الدموية بالإضافة إلى حالته الحرة ، لذلك من الأنسب استخدام البلازما التي تحتوي على عدد كبير من الصفائح الدموية كعينة. عند تحضير بلازما بشرية أو بلازما حيوانية ، في الوقت الحالي ، من أجل منع تلف الخلايا ، تستخدم الدول الأجنبية في الغالب فصل درجات الحرارة المنخفضة ، باستخدام عينات بلازما تحتوي على عدد كبير من الصفائح الدموية ، أي في ظروف فصل 4 × 1000 جم × 10 دقائق ، أو 3000 جم × 40 ظروف فصل الثواني عندما لا يكون هناك أجهزة طرد مركزي ذات درجة حرارة منخفضة. لا يُسمح بإجراء فصل عالي السرعة وطويل الأمد في درجات الحرارة العادية. بالإضافة إلى ذلك ، عند فصل البلازما أو المصل ، يجب تجنب التلوث الجرثومي.
تحضير المصل: استخدم محقنة بدون مضاد للتخثر لتجميع الدم ونقله إلى أنبوب طرد مركزي ، وضعه في حمام ماء مثلج لمدة 30 دقيقة ، عند 4 ، 1000xg ، 10 دقائق للطرد المركزي.
بعد فصل البلازما أو المصل ، إذا لم يتم استخدامها مؤقتًا ، يمكن تجميدها عند - 80 درجة مئوية واستخدامها خلال شهر واحد. ملاحظة لتجنب امتصاص السموم الداخلية ، يرجى استخدام أنبوب اختبار زجاجي للتخزين.
3. أنواع وتأثيرات مضادات التخثر
أثناء تحضير البلازما ، بسبب إضافة بعض مضادات التخثر ، يكون لنوع وكمية مضادات التخثر تأثير كبير على معدل الشفاء. بشكل عام ، تشتمل مضادات التخثر الشائعة الاستخدام بشكل أساسي على الهيبارين وسيترات الصوديوم و EDTA ، ومن بينها الهيبارين الأكثر استخدامًا. ومع ذلك ، فإننا نعلم أن كمية كبيرة من الهيبارين سوف تتداخل مع تفاعل الذيفان الداخلي ، خاصة بالنسبة لطريقة التسخين المخفف وطريقة استخلاص الكلوروفورم ، مما سيقلل من معدل الاسترداد ، ولكن له تأثير أقل على طريقة PCA ، وبالتالي فإن كمية الهيبارين المضافة ويطلق أثناء تحضير البلازما يحتاج فقط 2 ~ 5 ميكرولتر / مل يكفي