يتم استخدام جهاز الطرد المركزي للتجميد منخفض السرعة المكتبي في المختبر للفصل الأولي واستخراج الجزيئات البيولوجية الكبيرة ، والرواسب ، وما إلى ذلك. أنبوب الطرد المركزي مصنوع من الزجاج الصلب والبلاستيك الصلب والبولي إيثيلين وأنبوب الفولاذ المقاوم للصدأ. تم تجهيز جهاز الطرد المركزي بمحرك محرك ، وجهاز توقيت ، ومنظم (مؤشر سرعة) ونظام تبريد (نطاق درجة الحرارة القابل للتعديل - 20 ~ 40 درجة مئوية) ، والذي يمكن أن يحل محل الرؤوس الدوارة بقدرات مختلفة وأنواع مختلفة من سرعات الدوران وفقًا لاحتياجات مادة الطرد المركزي.

الخطوات التفصيلية للطرد المركزي لاستخراج البروتينات السيتوبلازمية والنووية بواسطة أجهزة الطرد المركزي منخفضة السرعة للتجميد المكتبي:

1. تحديد حالة نمو الخلية. يجب أن تكون حالة نمو الخلية 80٪ أو أفضل:

2. جهاز طرد مركزي بسرعة 1500 لفة / دقيقة لمدة 5 دقائق

3. تخلص من المادة الطافية ، واغسل الخلايا بحجم متساوٍ من برنامج تلفزيوني بارد ، وكرر 3 مرات كما في الخطوة 2

4. وفقًا لكمية الهطول المقدرة ، أضف 5 أضعاف حجم السيزبوفر متساوي التوتر في جزيئات الخلية لجعل الخلايا معلقة برفق وتجنب الرغوة قدر الإمكان

5. أضف lysisbuffer إلى الخلايا المعلقة وضعه على الجليد لمدة 15 دقيقة للسماح للخلايا بالتمدد ، والتي يمكن فحصها بواسطة المجهر

6. بالنسبة للخلايا الموسعة في تجربة الخلية ، أضف 10٪ IGEPALCA-630 حتى يصل التركيز النهائي إلى 0.3٪ ، واخلط جيدًا وأضف بلطف

7. أجهزة الطرد المركزي على الفور (استخدم أنبوب 1.5 مل EP عند 5500 لفة / دقيقة لمدة 30 ثانية للكميات الكبيرة ؛ استخدم أنبوب 50 مل عند 5500 لفة / دقيقة لمدة دقيقتين للكميات الكبيرة)

8. انقل المادة الطافية (البروتين السيتوبلازمي) إلى أنبوب تجميد جديد

9. قم بتعليق الخلايا التي تحتوي على 5 أضعاف حجم الجسيمات المعلقة في عازل متساوي التوتر واخلطها جيدًا

10. الطرد المركزي تعليق الخلية في 1500r / دقيقة لمدة 5 دقيقة ، وإزالة المادة طافية

11. تعليق الجزيئات مع حجم 2/3 أضعاف حجم امتصاص الصدمات

12. ضع الأنبوب على الخلاط الهزاز ، ورجه واخلطه بمعدل 700 لفة / دقيقة لمدة 15 دقيقة ، ثم عند 1400 لفة / دقيقة لمدة 15 دقيقة. يجب أن تكون العملية برمتها حذرة لتجنب الرغوة

13. جهاز طرد مركزي بسرعة 9400 لفة / دقيقة لمدة 15 دقيقة ، قم بنقل المادة الطافية إلى أنبوب الطرد المركزي المجمد الجديد بعد الطرد المركزي بدرجة حرارة منخفضة

14- تقسم إلى عدة أجزاء وتجميدها بالنيتروجين السائل وتخزينها (التخزين طويل الأجل يجب أن يكون عند - 80 ، التخزين قصير الأجل - 20 ℃) ​​